指数级富集配体的系统进化技术筛选高转移肝癌细胞HCCLM3的ssDNA适配子

摘要：

目的 采用指数级富集配体的系统进化(SELEX)技术筛选高转移肝癌细胞HCCLM3的ssDNA适配子.方法 构建长度为71 nt的随机文库,中间为25 bp的随机序列,通过12轮反复的SELEX筛选获得特异性结合HCCLM3细胞的ssDNA适配子,并初步测定筛选的适配子与细胞的亲和力,对结合力高的适配子进行克隆测序,用RNA struc-ture 5.3分析适配子序列的二级结构.结果 经过12轮正向筛选及6轮低转移肝癌细胞MHCC97-L的反筛后,获得了与HCCLM3细胞具有高亲和力的ssDNA适配子;将第12轮ssDNA经克隆测序获得10条测序结果,其中有4条序列一致,另外有2条序列也一致;二级结构预测可知ssDNA适配子二级结构主要以“发夹型”构型为主.结论 成功筛选获得了高亲和力的转移肝癌细胞HCCLM3 ssDNA适配子,为实现适配子靶向性治疗奠定了一定的理论基础.

关键词：指数级富集配体的系统进化技术、肝癌细胞、ssDNA适配子

所属期刊栏目：27

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：浙江省医药卫生一般研究计划;宁波市医学科技计划;上海市卫生计生委科研项目;浦东新区卫生系统重点学科建设项目

在线出版日期：2017-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：160-162