交叉引物恒温扩增技术快速检测副溶血性弧菌耐热直接溶血素基因
目的 建立一种特异、灵敏、简便的交叉引物恒温扩增(cross priming amplification,CPA)技术,快速检测副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)耐热直接溶血素基因(tdh).方法 根据GenBank上公布的VP tdh基因序列,在其保守区域设计CPA引物和探针,并对反应体系和反应条件进行优化,同时验证方法的灵敏度和特异性.结果 本方法对tdh基因检测具有高度特异性;对tdh阳性质粒DNA和菌液检测的灵敏度分别达到了1.8 × 101copy/μl和6.2×103 cfu/ml;对82份临床标本的检测阳性率与荧光PCR法相同,大大高于传统培养法.结论 本研究建立的CPA法快速、简便、灵敏、特异,适用于VP腹泻患者的床边诊断以及食物中毒的现场快速检验中.
副溶血性弧菌、交叉引物恒温扩增、tdh基因
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R446.5(诊断学)
国家科技攻关计划;浙江省医药卫生科技计划
2016-08-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1906-1908,1953