结核分枝杆菌重组抗原Rv0350的克隆表达和血清学评价

摘要：

目的 对结核分枝杆菌重组抗原Rv0350基因进行克隆表达和纯化,并对其抗原性进行评价,分析此种抗原的应用价值.方法 以结核分枝杆菌标准株H37Rv菌株基因组为模板,PCR扩增Rv0350基因片段,产物经验证后与载体质粒pET-32a构建重组质粒,转化入表达宿主E.coli BL21(DE3)菌株内,蛋白诱导纯化后基于酶联免疫吸附试验(ELISA),使用重组结核抗原Rv0350对183份血清进行检测.运用受试者工作特征曲线法计算抗原的最佳临界值(cut-off值),并计算该抗原的灵敏度、特异度曲线下面积(AUC)和诊断效率,对其诊断能力和应用价值进行综合评价.结果 经PCR扩增后的Rv0350基因片段电泳结果与目的基因相符,抗原诱导表达最佳时间为4h,纯化蛋白与预期结果相同,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果表明,该蛋白的灵敏度为75.3％,特异度为80.0％,诊断效率为77.6％,Yuden指数为0.553,AUC为0.828.结论 结核分枝杆菌重组抗原Rv0350具有良好的诊断灵敏度,有一定的临床应用价值.

关键词：结核分枝杆菌、Rv0350、酶联免疫吸附试验、受试者工作特征曲线

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分类号：R378.91+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项2013ZX100006-002-001

在线出版日期：2015-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1307-1310