埃可病毒9型VP1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

摘要：

目的 原核表达并纯化埃可病毒9型(ECHO9) VP1蛋白,免疫兔子制备多克隆抗体,鉴定重组蛋白的免疫活性,为ECHO9血清学检测试剂和疫苗研究提供依据.方法 PCR方法扩增VP1基因,构建原核表达质粒pET28a-VP1并转化到大肠杆菌(E.coli BL21),诱导表达并纯化VP1重组蛋白,免疫兔子制备抗VP1多克隆抗体,ELISA检测抗VP1抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性.病毒中和试验鉴定抗体中和ECHO9病毒的能力.结果 VP1重组蛋白在大肠杆菌BL21中高效表达,制备的抗VP1抗体效价为1∶105.Western blot检测结果显示,抗VP1多克隆抗体可以识别原核表达的VP1蛋白.中和试验显示抗体对ECHO9病毒有中和作用,其效价为1∶10.结论 本研究成功原核表达了ECHO9的VP1蛋白并制备出抗VP1多克隆抗体,有助于ECHO9的临床诊断、疫苗开发和分子病毒学研究.

关键词：埃可病毒9型、病毒性脑炎、VP1基因、多克隆抗体

所属期刊栏目：25

分类号：R373.2+4(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：杭州市科技发展计划项目20120633B22

在线出版日期：2015-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：951-953,965