胶原中羟脯氨酸的碱水解-光度法的水解条件优化

摘要：

目的 优化碱水解-光度法测定胶原中羟脯氨酸含量的水解条件,建立一种简化且准确的羟脯氨酸含量测定方法.方法 设计两因素五水平的正交试验,优化了胶原水解时碱浓度及水解时间对水解的影响.并对比碱水解-光度法与酸水解-光度法以及氨基酸分析仪法的检测结果,验证碱水解-光度法的稳定性和准确性.结果 分光光度法检测羟脯氨酸含量为0 mg/ml～0.15 mg/ml时线性良好,线性回归方程为y=0.008x +0.014 2,相关系数r=0.999.碱水解的适宜条件:0.1 kPa、121℃,2 mol/L NaOH,水解时间为20 min.在优化后的操作条件下,该法的平均回收率为101.3％,且与酸水解-光度法以及氨基酸分析仪法的检测结果差异无统计学意义.结论 在高温碱条件下水解,无需充氮,无需中和或去除盐酸,实验操作简便,缩短用时,水解速度大幅提高,且灵敏度高、重现性好,提升了检测效率,可快速测定羟脯氨酸含量,应用于动物蛋白的检测.

关键词：胶原、碱水解、羟脯氨酸

所属期刊栏目：25

分类号：O657.3(分析化学)

资助基金：广东省海洋经济创新发展区域示范专项;广东省科技计划

在线出版日期：2015-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：783-785,788