结直肠癌肿瘤细胞ELTD1基因表达水平及蛋白定位研究
目的 研究ELTD1基因在人结直肠正常上皮细胞和肿瘤细胞之间的表达差异,明确其表达蛋白的细胞定位.方法 分别抽提对数生长期的人结直肠癌LoVo细胞株和正常上皮细胞NCM460细胞株的总RNA,RT-PCR半定量技术扩增靶基因ELTD1和内参基因B2M(β2微球蛋白)的mRNA,利用ELTD1/B2M光密度比值来表示细胞ELTD1 mRNA的相对表达量;Western blot法检测2种细胞株靶蛋白ELTD1和内参蛋白GAPDH,利用ELTD1/GAPDH比值来表示ELTD1蛋白的相对表达量;间接免疫荧光技术检测LoVo细胞ELTD1蛋白的细胞定位.结果 LoVo细胞和NCM460细胞的ELTD1/B2M灰度比值分别为0.83±0.07和0.11±0.04,ELTD1/GAPDH灰度比值分别是0.74±0.1和0.12±0.04,差异有统计学意义(P＜0.05),荧光显微镜下,可见黄绿色荧光信号定位于细胞膜.结论 ELTD1基因在正常上皮NCM460细胞极低表达,而在人结直肠癌LoVo细胞株高表达,ELTD1蛋白定位于细胞膜,ELTD1是一种有助于结直肠癌的早期诊断、靶向治疗、疗效判断及预后的潜在生物标志分子.
表皮生长因子蛛毒素受体7次跨膜结构域蛋白1、LoVo细胞、NCM460细胞、结直肠癌、逆转录聚合酶链反应、免疫荧光、蛋白免疫印迹
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R735.3(肿瘤学)
浙江中医药大学科研基金资助项目2012ZY08
2015-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
541-543,547
