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分子诊断技术结合传统分离方法在致泻性大肠杆菌检测中的运用

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目的 为提高致泻性大肠杆菌(DEC)的检测水平,建立基于分子生物学技术结合传统分离方法来检测5种致泻性大肠杆菌,以解决传统的检测方法检测腹泻病人中的致泻性大肠杆菌困难,并应用于浦东新区腹泻人群的DEC监测.方法 从GenBank中下载各种致泻性大肠杆菌毒力基因序列,合成引物探针,优化设计TaqMan实时荧光PCR法结合传统分离方法,最终获得单克隆菌株.应用本方法对2013年1 658份粪便拭子进行致泻性大肠杆菌检测.结果 1658份粪便拭子中致泻性大肠杆菌总阳性率为8.93%(148/1 658),其中EPEC和ETEC各检出57株(3.44%),EIEC 6株(0.36%),EAEC 28株(1.69%).结论 TaqMan实时荧光PCR结合传统分离方法分离致泻性大肠杆菌,体现出非常高的准确性和检测效率,同时避免了志贺菌的漏检;通过为期一年的监测,致泻性大肠杆菌已成为细菌性感染性腹泻病原谱中首位病原,其组成结构呈多样性、显著的季节性特点.

致泻性大肠杆菌、实时荧光PCR、传统分离

25

R378.2+1(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))

国家科技重大专项2012ZX10004201

2015-03-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

467-470

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中国卫生检验杂志

1004-8685

41-1192/R

25

2015,25(4)

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