趋化因子受体CXCR5慢病毒载体构建及人Burkitt”s淋巴瘤Raji细胞的感染

摘要：

目的 构建可在人Burkitt”s淋巴瘤Raji细胞中高效表达人CXCR5基因的慢病毒载体,用于CXCR5在自身免疫性疾病发病机制中的研究.方法 取健康人外周血分离单个核细胞并提取总RNA逆转录为cDNA,扩增CXCR5的CDS序列,进行克隆,最终构建CXCR5基因的慢病毒穿梭质粒pLVX-IRES-ZsGreen1-CXCR5.磷酸钙共转染法包装慢病毒,感染人Burkitt”s淋巴瘤Raji细胞.空白质粒感染Raji细胞作为对照.免疫印迹分析空白质粒和过表达质粒Raji细胞中CXCR5基因表达.结果 测序显示CXCR5正确无误的插入到慢病毒穿梭载体pLVX-IRES-ZsGreen1多克隆位点中,且包装的慢病毒滴度达3×108 TU/ml,免疫印迹证实CXCR5基因在人Burkitt”s淋巴瘤Raji细胞中正确表达.结论 成功构建可在人Burkitt”s淋巴瘤Raji细胞中高效表达CXCR5基因的慢病毒穿梭载体,为研究CXCR5在自身免疫性疾病中的机制奠定了基础.

关键词：趋化因子受体CXCR5、慢病毒包装、Raji细胞、自身免疫性疾病

所属期刊栏目：24

分类号：R733.4(肿瘤学)

在线出版日期：2015-01-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3575-3577,3580