用于PCR检测的枣中霉菌DNA提取条件优化

摘要：

目的 提取霉变红枣中霉菌DNA,研究其适宜的提取条件.方法 采用氯化苄提取方法,以DNA浓度为指标,从提取溶剂pH、提取时间和氯化苄加入量3个方面对DNA的提取条件进行研究,在单因素实验的基础上,采用正交实验进行优化.结果 氯化苄提取红枣中霉菌DNA的最佳条件为:提取溶剂pH =8.8,提取时间为55 min,氯化苄量为320μl.各因素对CDNA影响的次序为:提取溶剂pH＞提取时间＞氯化苄量.方差分析表明,提取溶剂pH在所考察的范围内对CDNA影响显著,而提取时间和氯化苄量对CDNA在所考察的范围内影响不显著,最佳提取条件下,CDNA平均值为20.11 μg/ml.结论 应用氯化苄法提取枣中真菌DNA,不需要添加蛋白酶消解蛋白质,也不需要氯仿、苯酚等抽提蛋白质,且破壁与DNA提取可同时进行,方法简单、效率高,是检测霉变红枣中真菌的适宜方法.

关键词：聚合酶链式反应、霉菌、脱氧核糖核酸、提取

所属期刊栏目：24

分类号：Q939.5(微生物学)

资助基金：国家质检总局科技计划项目2013QK232

在线出版日期：2014-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3050-3052