正交试验设计优化小鼠脑组织中氨基酸类神经递质测定的实验研究
目的 用正交试验设计法优化测定小鼠脑组织中氨基酸类神经递质谷氨酸(glutamic acid,Glu)和y-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的实验条件,简化实验方法,提高检测方法的灵敏度.方法 以2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB)为衍生化试剂柱前衍生,采用正交试验设计法优化样品的衍生化条件.Symmetry(R)C1s色谱柱分离,等度洗脱,流动相为30 mmol/L NaAc缓冲液(pH 5.6)∶乙腈(3∶1,v/v),紫外检测波长360 nm,保留时间定性,外标法定量.结果 最佳衍生化条件:1%2,4-二硝基氟苯50μl、0.5 mol/L碳酸氢钠100μl、衍生温度85℃、衍生时间30 min.在优化的实验条件下,Glu和GABA在20 μg/ml~ 400μg/ml浓度范围内线性良好,相关系数均为1.0;加标回收率分别为91.5% ~ 98.7%和94.0%~97.7%;Glu的日内和日间精密度分别为2.83% ~ 7.18%和3.10% ~8.16%;GABA的日内和日间精密度分别为2.59% ~ 6.00%和2.46% ~ 5.64%.结论 该方法简便、准确、灵敏,适用于小鼠脑组织中氨基酸类神经递质的测定.
2、4-二硝基氟苯、正交试验设计、氨基酸类神经递质、高效液相色谱
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O224(运筹学)
2014-08-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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