高分辨熔解曲线技术检测HLA-G 14 bp插入/缺失突变方法的建立及初步应用

摘要：

目的 建立高分辨率熔解(HRM)技术检测人类白细胞抗原G(HLA-G) 14 bp插入/缺失突变的方法,并初步探讨其临床应用价值.方法 对HRM进行方法学评价.对100例EV71感染重症手足口病(HFMD)患儿、80例EBV感染传染性单核细胞增多症(IM)患儿和100例对照组进行HLA-G 14 bp插入/缺失突变的检测;用聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PCR-PAGE)法和产物测序法验证HRM分型.结果 不同基因型HRM检测的批内、批间熔解温度(Tm)值的变异系数(CV)均＜0.1％;HRM与PAGE及直接测序所得基因型相符.100份EV71感染HFMD患儿DNA样本经检测,10份为14 bp+/+纯合子基因型,42份为14 bp+/-杂合子基因型,48份为14 bp-/-纯合子基因型,与对照组比较差别有统计学意义(x2=6.181,P＜0.05),80份EBV感染IM患儿DNA样本与对照组比较差别亦有统计学意义(x2=8.531,P＜0.05).结论 本研究建立的HRM技术可用于HLA-G 14 bp插入/缺失基因突变的检测.

关键词：高分辨熔解曲线技术、人类白细胞抗原G、基因突变、EV71病毒、Epstein-Barr病毒

所属期刊栏目：24

分类号：Q754(分子遗传学)

资助基金：浙江省重点科技创新团队2012R10048-11;浙江省医药卫生科技计划项目2010KYA137;温州市科技计划项目Y20100258

在线出版日期：2014-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：719-722,725