抗冻蛋白TmAFP84在毕赤酵母中的表达

摘要：

目的 通过对黄粉甲抗冻蛋白TmAFP84进行基因克隆、表达,获得目的蛋白.方法 PCR扩增目的afp84基因,克隆到pUCm-T载体中测序并保存.通过双酶切将afp84基因定向重组到毕赤酵母表达载体pPIC9K中.醋酸锂转化法将重组质粒转化入毕赤酵母GS115,筛选出重组菌株.用0.5％甲醇诱导目的蛋白表达,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和海波银染鉴定目的蛋白.结果 经PCR扩增获得了目的基因片段alp84,克隆质粒pUCm-T与afp84重组获得了质粒pUCm-T-afp84.构建成功真核表达载体pPIC9K-afp84,目的抗冻蛋白TmAFP84经诱导后获得表达.结论 真核表达载体pPIC9K-afp84成功构建,并大量表达出目的抗冻蛋白,为扩大生产规模及深入研究抗冻蛋白的性质和应用奠定基础.

关键词：聚合链式反应、抗冻蛋白、真菌表达、毕赤酵母

所属期刊栏目：23

分类号：Q939.91(微生物学)

在线出版日期：2014-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：3225-3228