麻疹病毒HA基因克隆和表达的研究

摘要：

目的 构建麻疹病毒血凝素蛋白基因的重组质粒,使其在大肠埃希菌中表达HA蛋白,为麻疹病毒诊断奠定基础.方法 从麻疹病毒株MV07-30中提取核糖核酸,用RT-PCR扩增HA基因,用限制性内切酶BamH Ⅰ和HindⅢ双酶切HA基因片段和pGEM-Teasy载体,连接后获得重组质粒pGEM-Teasy-MVHA并克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+)；用IPTG诱导重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术进行重组蛋白表达的分析；通过Ni-NTA亲和层析获得高纯度目的蛋白.结果 RT-PCR获得的HA基因片段约长1700 bp.转化的大肠杆菌表达产物在SDS-PAGE中出现与目的蛋白分子量相一致的条带,且重组蛋白主要以包涵体形式存在；血凝及血凝抑制实验显示表达产物具有良好的抗原性.结论 构建麻疹病毒HA基因的原核表达体系,纯化的重组蛋白可用作麻疹病毒检测的抗原.

关键词：麻疹病毒、血凝素、基因克隆、原核表达

所属期刊栏目：23

分类号：R511.1(传染病)

资助基金：福州市科技局2009-S-93

在线出版日期：2013-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2481-2483,2486