TaqMan-MGB荧光定量PCR快速筛检NDM-1超级耐药菌方法的建立

摘要：

目的:针对NDM-1超级耐药菌建立TaqMan-MGB荧光定量PCR快速筛检方法.方法:根据GenBank登录的NDM-1基因序列设计TaqMan-MGB荧光定量PCR引物与探针.分别优化TaqMan-MGB荧光定量PCR反应条件和反应体系,并对已知特性的41株标准株、1株NDM-1阳参克隆株以及715株不同地区上送的地方株进行检测,验证方法的特异性、敏感性.结果:方法特异性好,除阳参克隆株能扩增出阳性对应条带,其它标准株及地方上送株均检测不出相应条带;方法敏感性好,检测限为8 cfu/反应;TaqMan-MGB荧光定量PCR法无需凝胶电泳、紫外观察,实现反应及产物检测一步完成,从菌株核酸提取至检测完成仅需1.5 h-2 h.结论:本研究针对NDM-1超级耐药菌建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法,其特异性、灵敏度均相对较好,可应用于针对NDM-1超级耐药菌的监测防控以及应急检测.

关键词：NDM-1超级耐药菌、TaqMan-MGB探针、实时PCR、筛检

所属期刊栏目：23

分类号：R446.5(诊断学)

在线出版日期：2013-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2000-2003