布氏田鼠催产素基因的克隆及通过慢病毒载体转染细胞后的过表达检测
目的:构建表达布氏田鼠催产素基因的慢病毒载体及过表达检测.方法:从布氏田鼠脑组织提取RNA逆转录PCR得到OT的cDNA片段,并分别连接到带有荧光素酶(luciferase,LUC)标记的慢病毒载体PGK启动子下游,以及带有绿色荧光蛋白(EGFP)标记的EF1A启动子下游,通过这两个载体转染细胞,分别利用生物发光标记与荧光标记这两种技术示踪OT基因的表达;再通过提取RNA逆转录以及实时荧光定量PCR检测OT基因不同模板转录的拷贝数.结果:成功构建LUC标记和EGFP标记的表达布氏田鼠催产素基因的慢病毒载体,进行了真核表达检测,并建立了实时荧光定量PCR的方法.结论:催产素(oxytocin,OT)基因是哺乳动物特有的神经垂体激素,与社会认知行为和社会适应行为有关,为研究该基因的功能奠定基础.
布氏田鼠、催产素、荧光素酶、绿色荧光蛋白
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Q754(分子遗传学)
农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室开放课题ChineseIPM1204;北京市自然科学基金资助项目7122110
2013-10-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
1835-1838