荧光定量PCR技术用于快速检测水痘-带状疱疹病毒的研究

摘要：

目的:建立特异、灵敏、高效的TaqMan荧光定量PCR方法用于水痘-带状疱疹病毒(VZV)的快速检测.方法:从GenBank下载几十株VZV基因序列进行同源性比对,选取高度保守区ORF62(编码即刻早期蛋白IE62)设计荧光定量PCR引物和TaqMan探针,并对反应体系与反应条件进行优化,同时验证方法的特异性、敏感性和重复性.结果:本方法对VZV的检测具有高度特异性,与肠道病毒EV71型,柯萨奇A、B组,麻疹病毒,风疹病毒,流感病毒以及相关腺病毒B、C组等均无交叉反应；检测灵敏度达36 copies/μl；反应体系具有很高的稳定性；整个操作过程仅需3h～4h.采用该方法对9份疑似VZV患者标本进行检测均为阳性,检测灵敏度明显高于病毒分离法、普通PCR法.结论:本研究建立的TaqMan荧光定量PCR方法特异、灵敏、高效,适用于VZV早期感染病例的快速确认以及暴发疫情的应急诊断中.

关键词：荧光定量PCR、TaqMan探针、水痘-带状疱疹病毒、ORF62

所属期刊栏目：22

分类号：R446.5(诊断学)

在线出版日期：2013-02-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2898-2900