新型隐球菌Cap10蛋白的重组表达及多克隆抗体制备

摘要：

目的:重组表达新型隐球菌Cap10蛋白并制备特异抗体,为新型隐球菌的检测和诊断提供特异抗原和抗体.方法:选择CAP1O基因开放阅读框架(ORF)抗原表位集中、保守性高的片段,经过大肠杆菌偏嗜的密码子优化后进行基因合成,将目的片段克隆至原核表达载体pQE30中构建重组蛋白表达载体pQE30-CAP10并鉴定,IPTG诱导重组蛋白在M15中表达,并用SDS-PAGE和Western blot鉴定;镍柱纯化后,免疫家兔制备抗血清.结果:在大肠杆菌中成功表达Cap10,其纯度大于95％;二免后家兔血清抗体效价达到200万以上.结论:获得了高纯度的Cap10蛋白及高效价的多克隆抗体,为新型隐球菌的检测和致病机制研究奠定了基础.

关键词：新型隐球菌、荚膜相关蛋白10(Cap10)、B细胞表位、多克隆抗体

所属期刊栏目：22

分类号：R446.5(诊断学)

资助基金：国家传染病防治科技重大专项2008ZX10001-007

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1229-1231,1236