甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白fliC-α基因的克隆、原核表达及鉴定

摘要：

目的:克隆甲型副伤寒沙门菌1相鞭毛蛋白抗原(Hl抗原)fliC -α基因,构建原核表达系统并鉴定重组蛋白的抗原性.方法:PCR方法扩增fliC-α基因,克隆到质粒pET -42a构建原核表达载体pET -fliC -a,转化E.coli BL21( DE3),IPTG诱导目的重组蛋白rfliC -α表达,用SDS - PAGE鉴定rfiC -α,Western blot和双向免疫扩散法鉴定rfliC -α的抗原性和免疫原性.结果:成功表达并纯化获得相对分子量为14.4 kDa的重组蛋白rfliC -α,rfliC -α能与兔抗甲型副伤寒沙门菌全菌血清发生特异性结合,免疫家兔获得高效价抗体.结论:成功构建了fliC-α基因原核表达系统,所表达的rfliC -α具有良好的抗原性.

关键词：甲型副伤寒沙门菌、flic-α基因、克隆、原核表达、鉴定

所属期刊栏目：22

分类号：R378.2+2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：教育厅科学研究项目20071350

在线出版日期：2012-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：681-683