利用大肠埃希菌分泌表达乙型肝炎病毒核心抗原

摘要：

目的:研究乙型肝炎病毒核心(C)基因在大肠埃希菌(E.coli)中的表达,以期获得分泌表达的具有良好免疫反应性和特异性的HBcAg.方法:构建重组质粒pET-3c-cAg、pET-30a-cAg、pGEX-4T-1-cAg,转入E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达HBcAg.SDS-PAGE、ELISA和Western blot对表达产物进行分析.结果:限制性内切酶酶切和DNA序列分析证实HBV C基因正确克隆到E.coli各表达载体中.ELISA和Western blot分析表明,以pET-3c和pET-30a为表达载体能在E.coli分泌表达HBcAg,而以pGEX-4T-1为载体只能胞内表达,其中以pET-3c为载体的分泌表达量最高,培养上清中其效价为1:128;用分泌表达的HBcAg作为诊断抗原检测抗-HBc阴阳性血清及国家参考品,符合率为100%.结论:成功获得HBcAg在E.coli的分泌表达,且其具有较高的特异性和免疫反应性.

关键词：乙型肝炎核心抗原、大肠埃希菌、表达、基因

所属期刊栏目：21

分类号：R378.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广东省卫生厅项目A2009193

在线出版日期：2011-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1685-1687,1690