荧光定量PCR结合TaqMan-MGB检测肾移植后患者尿中BK病毒
目的:建立一种检测肾移植术后患者尿中BK病毒的荧光PCR方法.方法:选择VP1基因作为检测目标,设计引物、探针,探针5”端用FAM标记,3”端标记MGB,建立重组质粒标准曲线,评价特异性、灵敏度、重复性;对本院收集的肾移植患者尿液标本进行检测.结果:本研究以BK病毒VP1基因中75 bp为靶基因,建立结合TaqMan-MGB的荧光PCR方法,灵敏度为10拷贝/μl,R<”2>:0.999;批间和批内的重复性(CV%)均小于5%.102例临床标本中检测到10例阳性标本,阳性率为9.8%,上述结果与测序验证结果一致.结论:结果表明BK病毒TaqMan-MGB探针荧光PCR方法的特异性好、灵敏度高、操作简便,可特异、快速、灵敏地对临床标本的BK病毒进行定量检测,可用于早期诊断BK病毒感染和预防肾移植术后BK病毒感染造成的相关肾病等方面.
荧光定量PCR、TaqMan-MGB、检测、BK病毒
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R373.9(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
温岭市科技局基金项目2007WLCA0051
2011-08-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1195-1197,1200