反向斑点杂交法检测肺炎支原体耐大环内酯类抗生素耐药基因

摘要：

目的:建立反向斑点杂交法快速检测肺炎支原体(MP)耐大环内酯类抗生素耐药基因.方法:根据MP 235rRNA V区域常见的耐药突变位点设计检测探针,将其分别点样在尼龙膜上制备成反向斑点杂交平台.以该区域序列已知的菌株和标准均株来扩增靶基因,扩增过程中掺人地高辛标记的dNTPs.扩增产物与尼龙膜上点样阵列杂交后,用地高辛检测试剂盒来检测,根据显色结果来判定相应位点突变情况.结果:斑点杂交法检测了24株临床菌株,结果显示A2063G或A2064G突变,与序列测定结果完全相同,同时未检测到A2063C和C2617G突变.结论:应用本方法可以快速、准确地预测MP对常见大环内酯类抗生素的耐药情况.

关键词：肺炎支原体、大环内酯、耐药基因、反向斑点杂交

所属期刊栏目：21

分类号：R375+.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：杭州市社会发展科技项目20061133B16

在线出版日期：2011-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：899-900,904