梅毒螺旋体重组蛋白rTpN37为抗原的ELISA的建立与RPR和TPPA血清学检测效果的比较

摘要：

目的:克隆并构建梅毒螺旋体tpN37基因原核表达系统,建立基于rTpN37的ELISA并对其用于梅毒血清学诊断的敏感性和特异性进行评价.方法:采用PCR扩增tpN37基因,构建tpN37基因原核表达系统.采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rTpN37表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rTpN37,Western blot鉴定rTpN37的免疫反应性.以rT-pN37为包被抗原,建立rTpN37-ELISA并用于检测122例梅毒病人血清,其检测结果与RPR和TPPA进行比较.结果:克隆的tpN37基因与GenBank中相关序列相似性为100%.rTpN37表达量为细菌总蛋白的20.4%.提纯的rTpN37在SDS-PAGE后显示为单一的蛋白条带.TPPA阳性的梅毒病人血清能有效识别rTpN37并与之结合.rTpN37-ELISA对梅毒病人血清标本检测阳性率为95.9%(117/122),与1甲PA检测阳性率(96.7%,118/122)相近(P>0.05),rTpN37-ELISA和TPPA检测阳性率均显著高于RPR(81.1%,99/122)(P<0.01).结论:本研究中成功地克隆并构建了梅毒螺旋体tpN37基因及其原核表达系统.以rTpN37为包被抗原的rTpN37-ELISA可作为快速、敏感和特异的梅毒血清学筛查方法.

关键词：梅毒螺旋体、tpN37基因、重组表达、酶联免疫吸附试验、血清学检测

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分类号：R377+.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：浙江省医药卫生科学研究基金2004A018

在线出版日期：2011-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2491-2493