人端粒酶催化亚基(hTERT)实时荧光定量PCR标准品的构建

摘要：

目的:构建用于检测人端粒酶催化亚基(hTERT)实时荧光定量PCR标准品.方法:通过逆转录PCR扩增得到目的片段后连接至pMD18-T载体,转化DH5α感受态细胞.分别经PCR和测序验证重组质粒的正确性.分光光度计测量重组质粒的吸光值,换算成拷贝数浓度后作梯度稀释制得质粒标准品.10倍梯度稀释质粒标准品后进行实时荧光定量PCR分析.结果:人端粒酶催化亚基(hTERT)基因片段成功克隆至pMD18-T载体之中,重组质粒序列完全正确.实时荧光定量PCR分析10倍梯度稀释的质粒标准品所得标准曲线良好.结论:成功构建了人端粒酶催化亚基(hTERT)实时荧光定量PCR标准品.

关键词：端粒酶逆转录酶、逆转录多聚酶链式反应、多聚酶链式反应

所属期刊栏目：20

分类号：R-331(医学研究方法)

在线出版日期：2011-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1853-1854,1857