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逆转录荧光PCR鉴定活性铜绿假单胞菌方法的建立

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目的:建立快速检测和甄别铜绿假单胞菌死活状态的定量方法.方法:根据铜绿假单胞菌gyrB基因序列设计引物和探针;提取铜绿假单胞菌菌体总RNA,采用一步法逆转录实时荧光定量PCR反应液对其进行检测.评价逆转录实时荧光定量PCR方法的特异性和敏感性,对收集的临床病人样本和模拟样本进行检测.结果:本试验建立的逆转录实时荧光定量PCR方法能特异、准确、快速的鉴定铜绿假单胞菌菌体死活状态,敏感度达102 cfu/ml.临床标本检测结果与细菌培养结果具有较高一致性.10份模拟样本鉴定结果也完全一致.结论:一步法逆转录实时荧光PCR方法能够有效快速检测铜绿假单胞菌,并能甄别死活状态.

铜绿假单胞菌、活性、逆转录荧光PCR

20

R446.5(诊断学)

2011-06-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

1299-1301

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