32株大肠埃希菌核酸检测鉴定分析
目的:对本实验室保存多年的32株大肠埃希菌进行核酸检测鉴定,同时验证所用引物的特异性及改用改良方法的可行性.方法:应用环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,参照最新LAMP改良方法,对32株大肠埃希菌及其它9株非大肠埃希菌实验对照株分别进行大肠埃希菌malB、不耐热性肠毒素I(heat labile I enterotoxin,LTI)和耐热性肠毒素I(heat stable I enterotoxin,STI)基因检测.结果:32株大肠埃希菌均扩增出大肠埃希菌malB基因,其中3株均扩增出LTI和STI基因,14株只扩增出LTI基因,1株只扩增出STI基因.整个检测过程仅需1.5 h,可通过肉眼目测绿色钙锰复合物是否生成判断结果.结论:32株大肠埃希菌从基因水平均得到鉴定;试验再次证实参考文献中设计的引物其特异性好;改用改良LAMP方法目测结果直观可行,可免去电泳、拍照两步,具有更快速、简便、经济等特点,极适合基层实验室人员应用于对可疑大肠埃希菌的鉴定检测.
核酸检测、大肠埃希菌、malB基因、不耐热肠毒素LTI、耐热性肠毒素STI
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R446.5(诊断学)
2010-11-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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