构建相应ompC基因质粒了解孔道蛋白突变与大肠埃希菌耐药的关系
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构建相应ompC基因质粒了解孔道蛋白突变与大肠埃希菌耐药的关系

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目的:研究和分析细胞膜孔道蛋白OmpC的突变与大肠埃希菌对抗生素生耐药的关系.方法:将野生株E.coliK-12的低拷贝孔道蛋白ompC基因转入两株临床分离的对抗生素耐药性不同的大肠埃希菌菌体细胞中(1号和7号),检测比较它们在转化前后对不同抗生素的MIC值.同时克隆1号和7号菌株的孔道蛋白ompC基因,构建相应的质粒分别转化人HN705受体细胞内,观察其细菌对药物的最低抑菌浓度(MIC)值的变化,了解孔道蛋白改变与细菌耐药的相关性.外膜蛋白采用SDS-PAGE电泳和质谱仪进行分析.结果:临床分离的1号大肠埃希菌在获得野生株ompC基因前后其MIC值无显著变化;临床分离菌株7号大肠埃希菌在获得野生株ompC蛋白基因后,对卡巴培能、美罗培南和亚胺培南的MIC值显著下降,对药物的敏感性增强,说明野生株ompC基因在7号菌体内表达以后恢复了细胞膜的部分通透功能,使更多的抗生素进入细菌体内达到作用靶位,降低了细菌对抗生素的耐药水平.结论:大肠埃希菌孔道蛋白ompC氨基酸序列的改变影响相应蛋白的表达,使细胞膜通透性降低,增加细菌对抗生素的耐药性.

细胞膜孔道蛋白、克隆、转化、质粒构建、突变

20

R378.9(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))

国家自然科学基金20000940

2010-11-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

985-987,1064

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中国卫生检验杂志

1004-8685

41-1192/R

20

2010,20(5)

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