荧光定量RT-PCR定量检测诺如病毒方法的建立及其评价
目的:建立荧光定量RT-PCR快速检测诺如病毒G Ⅰ、GⅡ的方法,以用于患者标本的检测、分型及绝对定量.方法:经过优化筛选出最佳反应体系及反应条件,建立荧光定量RT-PCR快速检测诺如病毒的方法;制作两种不同型号的荧光定量PCR仪的绝对定量标准曲线,并从灵敏度、特异性、重复性、对患者标本检测能力等方面对建立的方法进行综合评价.结果:该方法在两种不同型号的仪器上对108～101copy/μl范围内的病毒,具有良好的线性关系,最低灵敏度为101 copy/μl.与容易引起腹泻症状的轮状病毒、腺病毒、星状病毒、肠道病毒均无交叉反应;诺如病毒G Ⅰ、G Ⅱ两种常见感染人类的亚型之间无交叉反应.批内及批间重复性实验的标准差在0.10～0.59、变异系数在0.43%～2.84%之间,显示该方法重复性较好.用该方法共检测腹泻患者粪便标本181份,其中33份诺如病毒阳性,随机抽取10份阳性标本测序分析,结果证实均为诺如病毒.结论:本研究建立的诺如病毒荧光定量RT-PCR检测方法,灵敏度、特异性、重复性、对患者标本的检测能力等均显示较好的结果,且能快速区分G Ⅰ、G Ⅱ两种感染人类的重要亚型,在诺如病毒的快速检测中有着实际推广意义.
荧光定量RT-PCR、诺如病毒
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R446.5(诊断学)
广东省科技计划;深圳市科技计划;深圳市罗湖区科技计划
2010-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
467-469,558
