荧光定量RT-PCR检测临床标本中的肠道病毒RNA

摘要：

目的:建立一种快速、灵敏、易于操作的通用荧光定量RT-PCR方法用于检测肠道病毒.方法:在肠道病毒5'端的高度保守序列中选取能检测出所有型肠道病毒RNA的通用引物及Taqman探针.对荧光RT-PCR反应条件进行优化,用测定了TCID50的Cox B3病毒进行10倍梯度稀释以检测该方法最低检测病毒量,同时用45份心肌炎患者血液标本和12份脑炎患者脑脊液对方法进行检测.结果:荧光定量RT-PCR系统对于Cox B3病毒的最低检测量为0.01 TCID50/ml(50%组织培养感染剂量/ml)并且可以检测到小于1000拷贝/ml的含有Cox B3病毒5'端保守区DNA的质粒.同时45份病毒性心肌炎患者急性期血清临床标本中31份阳性,阳性率为68.9%.12份病毒性脑炎患者急性期脑脊液标本7份阳性,阳性率为58.3%.结论:本研究建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法,为肠道病毒的临床诊断及流行病学调查提供了一种快速、高灵敏度的实用方法.

关键词：实时荧光定量RT-PCR、肠道病毒

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分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2010-02-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1329-1331,1346