利用同源重组技术敲除金黄色葡萄球菌临床分离株sarA基因

摘要：

目的:利用同源重组技术敲除金黄色葡萄球菌临床分离株sarA基因.方法:构建含有Em抗性基因(ermB)和sarA基因上、下游同源DNA片段的pBT2-AsarA质粒,将pBT2-AsarA质粒电转入金黄色葡萄球菌RN4220中,再把pBT2-AsarA质粒转入金黄色葡萄球菌30临床分离株中,把含重组质粒的金黄色葡萄球菌30临床分离株在42℃条件下振摇培养,筛选金黄色葡萄球菌30菌株的sarA基因缺失可疑突变株(SA30-△arlS);对重组到SA30染色体基因组的相应序列进行PCR扩增及DNA测序.结果:成功构建pBT2-△sarA质粒,pBT2-△sarA质粒被转入金黄色葡萄球菌30后,筛选到可疑突变株,经PCR及DNA测序证实金黄色葡萄球菌30sarA基因被ermB基因置换.结论:利用同源重组技术成功敲除金黄色葡萄球菌30临床分离株sarA基因.

关键词：葡萄球菌、金黄色、同源重组、sarA基因

所属期刊栏目：19

分类号：R378.1+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：浙江省自然科学基金Y206461

在线出版日期：2010-02-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：17-20