宿主DNA对埃立克体病PCR诊断的抑制作用研究

摘要：

目的:优化埃立克体病的PCR诊断方法.方法:构建含有查菲埃立克体16S rRNA基因片段的重组载体.比较巢式PCR和普通一步法PCR的灵敏度差异.用RAW264.7细胞DNA模拟实验室诊断时的宿主细胞DNA,评估宿主细胞DNA对巢式PCR效率的影响.添加BSA作为优化剂,探讨BSA是否能降低宿主DNA的干扰.结果:巢式PCR可以扩增出特异性产物的最低模板量为103拷贝,一步法PCR是105拷贝.50～100 ng的宿主细胞DNA能够降低巢式PCR的效率.BSA可以降低宿主细胞DNA对PCR的抑制作用.结论:巢式PCR的灵敏度明显高于一步法PCR;BSA可以降低宿主细胞DNA干扰,提高PCR的效率.建议埃立克体病的诊断应尽量选择巢式PCR,必要时可加入适量的BSA以提高灵敏度.

关键词：埃立克体病、PCR诊断、宿主细胞DNA、BSA

所属期刊栏目：18

分类号：R-331(医学研究方法)

在线出版日期：2008-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：422-425