乐果单克隆抗体制备的初步研究

摘要：

目的:制备特异性抗乐果单克隆抗体(McAb).方法:采用生产乐果的中间体硫磷酯与1,4-二氨基丁烷反应合成乐果半抗原,利用碳二亚胺法,将半抗原与牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联,分别制备免疫原和包被原.将免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合,通过杂交瘤技术,制备特异分泌抗乐果McAb的杂交瘤细胞,并通过有限稀释法克隆化3次.用间接ELISA检测该McAb的效价和亲和性,用间接竞争ELISA检测与其他结构类似物的交叉反应率.结果:通过偶联,获得免疫原和包被原,半抗原与BSA和OVA的偶联比分别为13:1和11:1.通过杂交瘤技术,获得1株特异分泌抗乐果McAb的杂交瘤细胞,其培养上清与腹水效价分别为1:32和1:1024,McAb亲和常数为1.4×104 L/mol,与氧化乐果的交叉反应率为10.6%,与其他所测结构类似的农药交叉反应率均小于0.5%.结论:通过杂交瘤技术,获得l株特异分泌抗乐果McAb的杂交瘤细胞,但McAb效价、亲和力都较低,与制备试剂盒的要求尚有较大的差距.

关键词：乐果、单克隆抗体、杂交瘤细胞、效价、亲和常数、交叉反应

所属期刊栏目：18

分类号：R392-3

资助基金：浙江省科技厅资助项目2005F13021

在线出版日期：2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：40-41,124