10.3969/j.issn.1004-8685.2007.01.017
TaqMan-MGB荧光定量逆转录聚合酶链反应快速检测甲型流感病毒
目的:建立一种特异、灵敏、快速检测甲型流感病毒核酸的荧光定量RT-PCR方法.方法:根据GenBank登录的流感毒株序列,应用生物软件在甲型流感病毒膜蛋白(MP)基因的保守区设计与筛选引物和MGB探针,对荧光定量RT-PCR反应体系与条件进行优化,验证方法的特异性和敏感性.并通过对疑似流感临床样本的检测,以评价该方法的实际应用价值.结果:该方法对甲型流感病毒的检测有高度的特异性、通用性,对乙型流感、麻疹、风疹、腮腺炎、RSV和腺病毒等其他呼吸道病毒均无交叉反应,检测的灵敏度达0.1TCID50,可从疑似流感患者含漱液中直接检测流感病毒核酸,从病毒核酸提取至完成检测仅需2.5 h左右,且操作简便,重复性好.结论:本研究建立的MGB荧光定量RT-PCR的方法具有特异、敏感、快速的特点,适用于甲型流感疫情的应急快速检测.
荧光定量RT-PCR、TaqMan-MGB探针、甲型流感病毒、检测
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R4(临床医学)
2007-03-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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