改良分子信标-实时PCR快速检测志贺菌

摘要：

目的:建立改良分子信标-实时PCR检测志贺菌的快速方法,应用于志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测.方法:根据GenBank公布志贺菌ipaH基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立实时PCR-改良分子信标检测体系,应用于对志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测.结果:改良分子信标-实时PCR反应体系DNA灵敏度为93 fg/μl,菌液灵敏度为64 cfu/ml或2 cfu/PCR反应体系,无交叉反应.此反应体系检测67株志贺菌,均出现特异的荧光信号.对细菌性食物中毒样本等共657份样品进行志贺菌检测,42份志贺菌实时PCR阳性,其中41份志贺菌细菌培养阳性.从样品处理到检测结果仅需2 h～1 d时间.结论:改良分子信标-实时PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于志贺菌食物中毒的快速诊断,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段,对于提高肠道门诊的工作效率有重要意义.

关键词：志贺菌、改良分子信标、实时PCR、检测

所属期刊栏目：16

分类号：R446.61(诊断学)

资助基金：中国科学院资助项目30300281;广东省卫生厅科研项目A2003709;广东省深圳市科技局科研项目200404139

在线出版日期：2006-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：394-395,468