鼠肠粘膜乳糖酶活性测定方法的研究

摘要：

目的:乳糖酶是存在于小肠粘膜刷状缘上的双糖酶,在人体对乳糖的消化吸收过程中有其重要的作用.由于该酶的活性降低或缺失而导致的乳糖不耐受是十分常见的临床疾病.本文旨在通过对小鼠肠粘膜乳糖酶活性测定,建立一种测定小肠乳糖酶活性的方法,为对乳糖不耐受进行进一步研究提供一种方便、准确的检测方法,以对乳糖不耐受进行深入研究.方法:取鼠肠粘膜匀浆上清液与乳糖底物溶液反应一段时间,将酶灭活后与显色剂反应,在稳定呈色后于420 nm处比色,由标准曲线法计算出酶活性.结果:经实验确定测定小鼠小肠粘膜乳糖酶活性的最适pH为4.6,不同肠段间乳糖酶活性无明显差别,由L9(34)正交实验得出的该实验的较优条件为:水浴反应75 min,显色时间为45 min,TGO显色剂用量为3.0 ml.20份小鼠小肠粘膜标本的乳糖酶活性测定结果为:0.020～0.139 U/ml匀浆(0.063±0.022 U/ml匀浆);批内Sd=0.0026,CV=2.49%,S-x=0.0011;批间Sd=0.0043,CV=4.19%,S-x=0.0017.由L16(8×28)正交实验得出用大鼠的小肠粘膜进行实验时的较优条件为:底物溶液的pH为5.6,水浴反应60 min,加入显色剂3.0 ml,显色60 min.同时,显示大鼠的小肠乳糖酶活性随肠段分布不同有显著性差异.结论:本方法使用TGO显色剂来测定小肠粘膜乳糖酶活性,经动物实验,具有较高的精密度,结果重现性好.在将乳糖底物溶液的pH由4.6调整到5.6并调整相应的反应时间和显色时间后,可以用于大鼠小肠的乳糖酶活性测定.

关键词：乳糖不耐受、乳糖酶、测定

所属期刊栏目：16

分类号：O657.3(分析化学)

在线出版日期：2006-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：191-194