抗结核分支杆菌相关抗原单克隆抗体的制备及荧光抗体染色方法的建立

摘要：

目的:制备抗结核分支杆菌的特异单克隆抗体,经纯化标记荧光后,建立直接荧光抗体染色方法用于痰标本的检测.方法:采用常规方法制备单克隆抗体.分泌单克隆抗体阳性杂交瘤细胞株的筛选采用ELISA法,确认采用免疫印迹法.单克隆抗体的纯化采用饱和硫酸铵粗提,Sephadex G-50层析纯化.单抗纯化后采用透析法标记异硫氰酸荧光素,初步应用于临床痰涂片的检测. 结果:经筛选获得4株单克隆抗体杂交瘤细胞株.ELISA检测小鼠腹水单克隆抗体效价达到1:6 400～1:12 800.免疫印迹实验表明4株单抗均为抗结核杆菌 38 KD 蛋白单抗,其中两株产生较强的免疫反应条带.单抗纯化后标记异硫氰酸荧光素,建立直接荧光抗体染色方法,对41份结核病患者的痰标本进行检测,阳性率为 90.24%,与抗酸染色法比较,直接荧光抗体染色方法敏感性明显高于抗酸染色法(P<0.05).结论:制备抗结核杆菌 38 KD 蛋白的单克隆抗体,并建立直接荧光抗体染色方法,初步应用于临床痰涂片检测中,对于辅助诊断结核病具有一定价值.

关键词：结核分支杆菌、单克隆抗体、免疫荧光染色方法

所属期刊栏目：15

分类号：R378.91+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2005-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1342-1343,1372