酸奶中β-内酰胺酶的快速检测方法
目的 建立酶热生物传感器法用于快速检测酸奶中β-内酰胺酶.方法 酸奶样品于4℃下5 000 r/min离心10 min,取中间层清液与一定量青霉素G混合,室温震荡反应3h,使样品中 β-内酰胺酶充分酶解加入的青霉素G底物,然后直接通过酶热生物传感器进行分析.酶热生物传感器中装备有专一性酶柱,能够特异性地与青霉素G进行反应,并对其含量进行测定.根据震荡反应前后酸奶样品中青霉素G含量的变化,可以推算出酸奶样品中β-内酰胺酶的活性.结果 该方法样品检出限为2 U/ml,定量限为4 U/ml;线性范围4~20 U/ml,3个加标水平(6 U/ml、10 U/ml、18 U/ml)的平均回收率在85% ~ 110%之间,相对标准偏差小于20%.结论 本文所建立的酶热生物传感器法能够快速测定酸奶中β-内酰胺酶活性,与传统微生物法相比,操作简单、仪器可便携,显著节约了检测时间和成本,是传统方法的有力补充,更适合于大规模样品筛查和现场检测.
β-内酰胺酶、酶热生物传感器、酸奶、青霉素G
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R155.5;TS252.7(营养卫生、食品卫生)
国家自然科学基金81001248
2013-08-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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