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壳聚糖氧化铁纳米颗粒包裹MDRl shRNA与对胶质瘤细胞转染的影响

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目的 探讨多药耐药基因短发卡RNA (MDR1 shRNA)与壳聚糖氧化铁(Fe3O4)纳米颗粒对胶质瘤细胞系转染的影响.方法 设计并合成针对MDR1的shRNA序列与pSIREN-Re仃oQ质粒载体连接,提取质粒,制备壳聚糖纳米颗粒并包裹制备的质粒,测定包封率及粒径分布.培养人类胶质母细胞瘤BT325共转染,测定转染效率.结果 质粒pSIREN-RetroQ-RNAi经双酶切后测序验证,与实验设计的shRNA长度相符.壳聚糖一铁纳米粒子的粒径为100~300 nm,分布较均匀,包裹质粒DNA包封率为97%~99%.壳聚糖Fe3O4纳米粒子包裹质粒经PI试剂转染BT325细胞,在共转染24 h开始表达,荧光显微镜下呈绿色荧光,48 h表达最强.转染效率为70%~80% (P <0.05).结论 MDR1 shRNA表达质粒与壳聚糖Fe3O4纳米粒子结合,可提高胶质瘤细胞系BT325转染效率,转染后细胞可以正常生长,可以为进一步的靶向基因检测及治疗提供有意义的思路.

神经胶质瘤、短发卡RNA、壳聚糖氧化铁、纳米颗粒、基因治疗

18

R739.41;R730.264(肿瘤学)

国家自然科学基金青年基金项目30900342;北京市科技新星项目2010B030

2013-04-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共4页

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1009-122X

44-1459/R

18

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