pEGFP-ING4真核表达载体的构建及在人脐静脉内皮细胞中的表达

摘要：

目的 构建携带生长抑制因子4(ING4)基因的真核表达载体pEGFP-ING4并转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),为进一步研究ING4对胶质瘤血管生成影响提供基础.方法 提取人胎盘细胞中总RNA,RT-PCR扩增 ING4并克隆至pEGFP-C2载体,酶切电泳鉴定出阳性克隆送测序,利用靶向转染试剂jetPEI-HUVEC转染HUVEC,通过免疫组化检测转染细胞中ING4的表达.结果 成功扩增ING4基因,基因全长747 bp.重组质粒pEGFP-ING4的酶切鉴定及测序结果均证明ING4基因成功克隆到真核表达载体中.酶切片段电泳结果表明:目的 条带与ING4的开放读码框大小相符;测序结果和ING4的开放读码框比对相似性为100%.转染重组质粒后的HUVEC中ING4蛋白表达水平增强.结论 本实验成功构建携带ING4基因的真核表达载体 pEGFP-ING4,并可在HUVEC中获得ING4 蛋白的增强表达.

关键词：生长抑制因子4、内皮细胞、转染、基因表达

所属期刊栏目：16

分类号：R73-3;R739.41(肿瘤学)

资助基金：广东省科技计划项目基金2007B031514001

在线出版日期：2011-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：38-41