尿刊酸修饰壳聚糖载体负载中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白干扰RNA对结肠癌细胞增殖和迁移及凋亡的实验研究
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10.3760/cma.j.issn.1671-0274.2017.06.021

尿刊酸修饰壳聚糖载体负载中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白干扰RNA对结肠癌细胞增殖和迁移及凋亡的实验研究

引用
目的 探讨尿刊酸修饰壳聚糖(UAC)负载siRNA对中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)的基因沉默作用及对结肠癌细胞增殖、 迁移和凋亡的影响.方法 采用UAC和壳聚糖(CTS)分别包裹NGAL siRNA转染结肠癌细胞株HT-29,采用实时荧光定量PCR检测NGAL的表达量,并分析NGAL基因沉默与细胞增殖、 迁移及凋亡的关系.结果 荧光显微镜下显示,UAC-siRNA的转染效率为(37.52±7.17)%,高于CTS-siRNA的(11.32±3.39)%,差异有统计学意义(t=6.102,P=0.005).siRNA转染48 h后,以GAPDH为内参,测得UAC组NGAL基因的相对表达量为0.350,CTS组NGAL基因的相对表达量为0.529,差异有统计学意义(t=-3.743,P=0.02).增殖实验显示,UAC和CTS两组与对照组相比,细胞增殖率稍有下降,但差异无统计学意义(F=9.520,P=0.438).而迁移实验显示,UAC组和CTS组HT29细胞的24 h迁移率均低于对照组(F=6.756,P=0.029);其中UAC组HT29细胞的24 h迁移率为(77.90±7.14)%,低于CTS组的(87.67±3.98)%(t=-1.704,P=0.164).凋亡检测显示,转染后2 d,UAC组细胞凋亡率为(15.800±1.054)%,高于CTS组的(12.900±0.656)%和对照组的(11.933±1.914)%,差异有统计学意义(F=7.004,P=0.027).结论 CTS经尿刊酸修饰为UAC后,包裹能力及转染效率显著增加;以UAC为载体的siRNA干扰NGAL基因后,可沉默HT29结肠癌细胞株NGAL基因的表达,抑制HT29结肠癌细胞迁移,促进细胞凋亡.

结直肠肿瘤、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白、壳聚糖、RNA干扰

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R73;R75

浙江省科技厅公益项目2013C33210;浙江省卫生厅骨干人才项目2013RCB013;杭州市科技局重点专科专病项目20140733Q20The public projects fund from the Science and technology pepartment of zhejiang province2013C33210;The Backbone talents projects fund from the Health Department of zhejiang provinc2013RCB013;The key specialty and special disease projects fund from the science and technolog bureall of Hangzhou city20140733Q20

2017-07-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

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1671-0274

44-1530/R

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2017,20(6)

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