脆性组氨酸三联体基因对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨脆性组氨酸三联体基因(FHIT)转染对结肠癌细胞株SW480增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 将重组真核表达质粒pRc/CMV2-FHIT通过脂质体转染技术导入人结肠癌细胞株SW480(实验组),筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染了空质粒pRc/CMV2的SW480细胞作为阴性对照,以正常SW480细胞作为空白对照.应用MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western blot分析caspase-8酶原的变化,半定量RT-PCR检测caspase-8 mRNA水平的改变,肽核酸标记底物的比色法检测caspase-8的相对活性.结果 转染96 h后,实验组和阴性对照组细胞生长抑制率分别为71.7%和16.9%,G0/G1细胞比例分别为(63.3±3.5)%和(50.6±2.1)%,细胞凋亡率分别为(40.5±3.1)%和(18.6±2.6)%,caspase-8 mRNA条带光密度积分值分别为107和41,caspase-8蛋白相对活性分别为0.43和0.25;上述差异均有统计学意义(P＜0.05).当加入FHIT抑制剂后,caspase-8蛋白相对活性恢复至对照组水平(0.22).结论 FHIT基因转染能够明显抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,诱导SW480细胞发生G0/G1期阻滞,其作用机制可能与caspase-8表达及活性上调有关.

关键词：结肠肿瘤、脆性组氨酸三联体基因、结肠癌细胞株SW480

所属期刊栏目：13

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：广东省自然科学基金06020005

在线出版日期：2010-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：691-694