结直肠癌转移生物标记物的蛋白质组学研究

摘要：

目的 应用蛋白质组学技术寻找结直肠癌转移潜在标志物,研究氟尿嘧啶(5-FU)对差异蛋白表达的影响,并初步探讨结直肠癌的转移机制.方法 常规培养Lovo及SW480细胞至指数生长期后提取蛋白.采用MTT法检测5-FU对此两种细胞的半数抑制浓度(IC50),分别用IC50的5-FU干预Lovo和SW480细胞后提取蛋白.对所提取的蛋白进一步行二维凝胶电泳,选取表达有显著差异的点进行质谱检验和生物信息学分析.采用Western blot及免疫荧光验证5-FU作用前后两种细胞显著差异蛋白的表达.结果 二维凝胶电泳和质谱分析成功鉴定出11种差异蛋白,根据预设条件筛选出:核内不均匀核糖核蛋白K(hnRNP K)、蛋白质二硫键异构酶(PDI).Western blot及免疫荧光实验显示:Lovo细胞株中hnRNP K蛋白表达较SW480高,PDI蛋白表达较SW480低;5-Fu干预后,Lovo细胞株中hnRNP K蛋白表达下调程度较SW480显著,免疫荧光强度减弱,SW480细胞株中PDI蛋白表达上调幅度较Lovo细胞显著.免疫荧光强度增强.结论 hnRNP K和PDI表达在不同转移潜能结直肠癌细胞系Lovo和SW480存在显著差异,5-FU干预后其表达有着规律性改变.

关键词：结直肠肿瘤、Lovo细胞、SW480细胞、氟尿嘧啶、肿瘤转移、蛋白质组学

所属期刊栏目：12

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：上海市科技发展重大项目07DZ19505

在线出版日期：2010-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：618-622