10.13498/j.cnki.chin.j.ecc.2023.03.09
简易灌注装置同时提取成年小鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞
目的 简化Langendorff灌注装置,并且同时提取成年小鼠心肌细胞(AMCM)和心脏成纤维细胞(AMCF)用于实验.方法 采用简易灌注装置进行成年小鼠主动脉逆行灌注,同时提取AMCM和AMCF.对其进行形态学观察,并分别通过L-苯肾上腺素(PE)和转化生长因子(TGF)-pl刺激诱导AMCM肥厚和AMCF向肌成纤维细胞分化,以评估其生物学功能.结果 复钙后耐钙杆状AMCM占比(62.65±3.12)%,并且可以在体外培养超过1周,与对照组相比,PE刺激后AMCMβ-肌球蛋白重链、心钠肽蛋白表达水平显著升高(P<0.05),杆状AMCM长宽比显著缩小(P<0.05).AMCF纯度较高,在体外可以传代3~4次,与对照组相比,TGF-β1刺激后AMCF Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、α-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)蛋白表达水平显著升高(P<0.05)和荧光强度显著增强(P<0.05).结论 简易灌注装置可以简单、稳定、高效地同时提取满足实验需求、具备生物学功能的AMCM和AMCF.
Langendorff灌注装置、心脏灌注、成年小鼠心肌细胞、成年小鼠心脏成纤维细胞、细胞提取、细胞培养
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Q95-33;R711.2;R587.2
国家自然科学基金82170336
2023-08-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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