低氧条件下缺氧诱导因子-1对胎鼠心肌细胞内钙离子转运的影响

摘要：

目的 观察低氧条件下缺氧诱导因子-1(HIF-1)对胎鼠心肌细胞内钙离子(Ca2+)转运的影响,探索胎儿心肌保护新方法.方法 取胎龄14~18 d Sprague-Dawley(SD)大鼠胎鼠的心肌细胞置于含5%CO2,3%O2和92%N2的三气培养箱在37℃下培养24 h,分3组进行干预:对照组;HIF-1激动剂(DMOG)100μM(DMOG组);HIF-1抑制剂(Acriflavine)10μM(Acriflavine组).共同作用24 h后,分别进行实时荧光定量PCR(real time-PCR,RT-PCR)和免疫印迹分析(Western-blot)检测胎鼠心肌细胞HIF-1α、L型Ca2+通道(LCa)、T型Ca2+通道(TCa)、钠钙交换蛋白(NCX)、Ryanodine受体和肌质网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)mRNA表达及蛋白水平.在激光共聚焦显微镜下观察心肌细胞内Ca2+浓度的变化.结果 RT-PCR结果显示HIF-1α的mRNA表达量DMOG组较对照组显著升高,Acriflavine组较对照组和DMOG组显著降低,TCa的mRNA表达量DMOG组较Acriflavine组显著升高、NCX的mRNA表达量DMOG组较对照组显著升高,Acriflavine组较对照组和DMOG组显著降低,Rynaodine受体的mRNA表达量Acriflavine组较对照组显著降低,DMOG组较Acriflavine组显著升高,SERCA2α的mRNA表达量Acriflavine组较对照组和DMOG组显著升高(P<0.05,n=5);Western-blot结果显示HIF-1α的蛋白表达量DMOG组较对照组及Acriflavine组均显著升高,LCa的蛋白表达量DMOG组较对照组及Acriflavine组显著升高(P<0.05,n=5).激光共聚焦显微镜下测定钙荧光量,DMOG组较对照组及Acriflavine组显著增加(P<0.001,n=12).结论 在低氧条件下,DMOG过度激活HIF-1,使胎鼠心肌细胞内Ca2+超载明显,Acriflavine抑制HIF-1活性,减轻胎鼠心肌细胞Ca2+超载,增强心肌细胞调节Ca2+的能力,对未成熟心肌起保护作用.

关键词：低氧、缺氧诱导因子-1、SD胎鼠、心肌细胞、钙离子转运

所属期刊栏目：15

分类号：P64;R5

资助基金：国家自然科学基金项目81370274

在线出版日期：2017-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：113-118