TSLC1真核表达载体的构建及在HepG2肝癌细胞中的表达

摘要：

目的 构建TSLC1真核表达载体,并转染到肝癌细胞HepG2中使之表达,为研究TSLC1的抗肝癌作用奠定基础.方法 利用RT-PCR技术扩增TSLCl基因全长,并与真核表达载体pRe-ceiver-M29进行连接;应用双酶切、PCR以及测序鉴定此连接载体;脂质体Lipofectamine 2000介导重组载体转染到HepG2细胞中,经G418筛选建立稳定转染细胞株,分别采用RT-PCR和免疫组化法检测其表达.结果 RT-PCR获得了约1 329 bp大小的TSLC1基因片段;经过双酶切、PCR以及测序鉴定证实TSLC1 基因片段正确插入真核表达载体pReceiver-M29中;与对照组比较,RT-PCR方法可见显示转染组细胞TSLClmRNA表达明显增多,免疫组化法可见显示转染组细胞TSLCl 蛋白表达明显增高.结论 成功构建了真核表达载体pReceiver-M29-TSLC1,建立了稳定转染TSLC1的HepG2细胞株.

关键词：TSLC1、聚合酶链反应、克隆、HepG2

所属期刊栏目：15

分类号：Q7822(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省发展与改革委员会资助项目

在线出版日期：2010-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：89-94