灵芝多糖GLPL1免疫原优化及其单克隆抗体制备
目的:优化灵芝多糖GLPL1免疫原,用于制备GLPL1单克隆抗体,为GLPL1免疫分析法建立提供物质基础.方法:GLPL1经1-氰基-4-二甲胺吡啶四氟硼酸盐(CDAP)活化后与牛血清白蛋白(BSA)共价偶联,制备系列拟糖蛋白GLPL1-BSA并考察其免疫原性;选择其免疫性强者免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备GLPL1特异性单抗.结果:共获得取代度(GLPL1/ BSA摩尔比)分别为≈1 、≈3 、≈6 三种拟糖蛋白GLPL1-BSA,其免疫小鼠后诱导产生强烈的抗GLPL1的IgM初次应答和IgG回忆应答,且GLPL1诱导小鼠主要分泌IgG2a独特型抗体;经细胞融合、筛选和亚克隆,获得一株分泌GLPL1特异性抗体杂交瘤细胞6G7,其抗体独特型为IgM.结论:成功优化、制备了灵芝多糖GLPL1的免疫用抗原和GLPL1特异性单克隆抗体.
灵芝、多糖、GLPL1、拟糖蛋白、免疫原性、单克隆抗体
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Q538;Q785(糖(醣))
国家自然科学基金30472061;江苏省高技术研究发展计划项目BG2006609
2008-01-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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