高糖刺激促进硫氧还蛋白相互作用蛋白表达并引起胰岛β细胞损伤的机制研究

摘要：

目的 研究高糖刺激通过过表达硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)对胰岛 β 细胞产生损伤的分子机制.方法 采用高糖培养基(25 mmol/L)对胰岛 β 细胞INS-1进行高糖刺激,并用缺氧标记物哌莫硝唑和反应性氧化物(ROS)探针检测对细胞缺氧和ROS堆积的刺激作用.确认高糖刺激对细胞缺氧和ROS堆积的影响后,采用半定量Western blot检测高糖和ROS堆积对TXNIP蛋白表达水平的影响;采用ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸或ROS促进剂(tBHP)预处理细胞.采用LDH渗漏实验和Annexin V/PI流式细胞检测细胞凋亡技术检测高糖刺激产生的细胞损伤.结果 高糖刺激胰岛 β 细胞48 h后,相对于0 h正常糖组,细胞出现缺氧现象,且ROS升高(4.15±0.19)倍(P<0.05);48 h高糖刺激引起TXNIP蛋白水平升高,且硫氧还蛋白活性下降为正常糖组(0.42±0.17)倍(P<0.05).同时,ROS清除剂减弱了高糖刺激对TXNIP的表达促进作用;tBHP引起的ROS堆积可升高TXNIP表达量.LDH渗漏实验和凋亡率检测结果显示,高糖通过引起INS-1细胞中ROS堆积并引起细胞损伤和凋亡.结论 高糖刺激可能通过引起ROS堆积引起TXNIP蛋白表达增加,抑制TRX活性并造成细胞损伤.

关键词：高糖胁迫、活性氧化物、胰岛β细胞、硫氧还蛋白相互作用蛋白、硫氧还蛋白

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资助基金：成都医学院第一附属医院独立资助课题CYFY15DL-05

在线出版日期：2019-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：294-299