受体相互作用蛋白140对吡格列酮改善胰岛β细胞糖脂毒性损伤的影响

摘要：

目的 探讨过氧化物酶增殖活化受体-γ(PPAR-γ)激动剂吡格列酮对胰岛β细胞糖脂毒性损伤的保护及受体相互作用蛋白140(RIP140)在其中的介导机制. 方法 将胰岛β细胞株MIN6细胞分为NC组、高糖高脂组、吡格列酮干预组.稳定过表达RIP140的MIN6细胞(O-RIP140-MIN6)和过表达绿色荧光蛋白(GFP)的MIN6细胞(GFP-MIN6).分别予高糖高脂(25 mmol/L葡萄糖+500 μmol/L棕橺酸)和/或10 μmol/L吡格列酮干预.利用MTT分别检测各组细胞增殖率、流式细胞仪检测凋亡率、RT-PCR检测RIP140 mRNA、Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达、硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平及黄嘌呤氧化酶法检测超氧化合物歧化酶(SOD)含量. 结果 NC组、高糖高脂组及吡格列酮干预组MTT吸光值分别为:24 h(1.80±0.04)、(0.95±0.04)及(0.97±0.03);48 h(2.70±0.11)、(1.04±0.06)及(1.30±0.03).NC组与高糖高脂组比较,差异有统计学意义(24 h:t=25.94,P＜0.01,48 h:t=24.00,P＜0.01).高糖高脂组与吡格列酮干预组比较,差异有统计学意义(48 h:t=9.37,P＜0.01).各组间的24 h凋亡率分别为(2.93±0.66)％、(48.08±3.95)％(vs NC组,t=19.54,P＜0.01)及(31.38±3.92)％(vs高糖高脂组,t=5.20,P＜0.01).Bd-2相对表达量分别为(1.14±0.06)、(0.42±0.02)(vsNC组,t=20.52,P＜0.01)及(0.86±0.04)(vs高糖高脂组,t=17.71,P＜0.01).RIP140表达量分别为(1.13±0.11)、(2.34±0.21)(vs NC组,t=9.69,P＜0.01)及(1.63±0.13)(vs高糖高脂组(t=5.03,P＜0.01);高糖高脂组与NC组比较,MDA[(10.13±0.47vs(5.00±0.26) nmol/mg,t=16.57,P＜0.01]、SOD[(5.15±1.07)vs (12.25±1.25) nmol/mg,t=7.51,P＜0.01]比较,差异均有统计学意义.高糖高脂组与吡格列酮干预组比较,MDA[(10.13±0.47)vs (7.83±0.36)nmol/mg,t=6.77,P＜0.01]、SOD[(5.15±1.07)vs (8.74±0.59)nmol/mg,t=5.16,P＜0.01)差异有统计学意义.O-RIP140-MIN6和GFP-MIN6细胞分别给予高糖高脂及吡格列酮处理后,两组MTT吸光值:24 h(1.04±0.07) vs (1.40±0.16)(t=5.01,P＜0.01),48 h(1.16±0.13)vs(1.98±0,14)(t=10.73,P＜0.01).凋亡率为(41.95±4.88)％vs(31.26±2.86)％(t=2.97,P＜0.05)、Bcl-2相对表达为(0.22±0.04) vs(0.76±0.03)(t=21.54,P＜0.01),SOD为(7.53±0.71) vs (9.62±0.43) nmol/mg(t=4.36,P＜0.05),MDA为(10.23±0.28) vs(8.15±0.38) nmol/mg(t=7.63,P＜0.01). 结论 高糖高脂促进胰岛β细胞损伤,吡格列酮通过下调RIP140表达来抑制高糖高脂对胰岛p细胞的损伤.

关键词：受体相互作用蛋白140、吡格列酮、胰岛β细胞、糖脂毒性

所属期刊栏目：24

分类号：R39;R97

资助基金：国家自然科学基金81170769;长江大学联合项目基金WJ2016-YZ-06

在线出版日期：2017-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1094-1099