10.3969/j.issn.1006-6187.2013.09.020
血清淀粉样蛋白A-siRNA沉默对波动性高血糖培养下肾小球系膜细胞分泌细胞外基质及炎症因子的影响
目的 研究SAA-siRNA沉默对波动性高糖培养下人肾小球系膜细胞(HMCs)炎症反应及细胞外基质(ECM)的影响,探讨波动性高糖与糖尿病慢性肾脏疾病(CKD)的关系及血清淀粉样蛋白A(SAA)在CKD发生发展中的作用. 方法 传代培养5~9代的HMCs,同步化后分6组进行实验.荧光倒置显微镜观察siRNA转染效率;real-time RT-PCR技术检测SAA及TNF-α的mRNA表达;Western Blot印迹检测细胞内SAA蛋白的表达;ELISA法检测细胞上清液中SAA、纤连蛋白(FN)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况. 结果 分组培养48 h后,高血糖(HG)组SAA、FN及TNF-α的表达较对照(NC)组升高(P<0.05),波动性高血糖(FG)组较HG组表达升高(P<0.05);波动性高血糖+SAA-siRNA(FG+ SAA-siRNA)组SAA、FN及TNF-α表达较FG组降低(P<0.05). 结论 波动性高血糖可引起HMCs更高水平SAA、FN及TNF-α的表达;通过SAA-siRNA沉默SAA表达,可减少波动性高血糖刺激下HMCs的FN、TNF-α分泌,减少肾小球ECM积聚和炎症反应,为CKD防治提供新的实验依据.
血清淀粉样蛋白A、RNA干扰、人肾小球系膜细胞、波动性高血糖
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R74;R68
辽宁省医学高峰建设工程重点科研项目200938;沈阳市科技攻关计划项目F11-262-9-06
2013-11-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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