胎儿胰腺组织中巢蛋白阳性细胞的分离和体外增殖以及诱导分化

摘要：

目的研究从胎儿胰腺组织中分离巢蛋白(Nestin)阳性细胞以及该细胞的体外扩增与向胰岛内分泌细胞分化的能力. 方法采用胶原酶消化法,从胎儿胰腺组织中分离获得胰岛样细胞簇(islet-like cell clusters,ICCs), ICCs经手工挑拣后接种,待形成单层上皮样细胞后,进行传代培养和诱导分化.利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光染色及放射免疫分析(RIA)等方法,检测该细胞中分子标志物的表达,并对其向胰岛内分泌细胞分化的能力进行鉴定. 结果 (1)上述单层上皮样细胞具有很强的增殖能力,可至少连续传16代;(2)RT-PCR、免疫荧光染色分析显示,该细胞可表达干细胞的标志分子巢蛋白和ABCG2;(3)RT-PCR分析显示,在多种细胞因子和无血清的条件下,巢蛋白阳性细胞经诱导后可出现胰岛素、胰升糖素和胰十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)mRNA的表达,而巢蛋白和Neurogenin3(Ngn3)mRNA表达消失.RIA分析也可检测到诱导后的细胞内有胰岛素产生. 结论从胎儿胰腺中分离得到的巢蛋白阳性细胞具有胰腺前体细胞的特性,在体外具有很强的增殖能力,并可诱导分化为胰岛内分泌细胞.该细胞有望为胰岛移植提供一种新的细胞来源.

关键词：胎儿、胰腺、胰腺干细胞、巢蛋白

所属期刊栏目：11

分类号：R587(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：国家自然科学基金30170443;国家"211"工程建设项目;国家重点基础研究发展计划973计划

在线出版日期：2004-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：416-420