中国人常见非综合征性聋杂合子发病机制的实验研究

摘要：

目的 构建人野生型Cx30红色荧光表达载体,将Cx26野生型和突变型分别与Cx30共同转染HEK293细胞,为揭示Cx26-235 deIC的杂合突变患者的发病机制提供实验依据.方法 构建pCx30-IRES2-DsRed-Express真核表达载体,将pCx30-IRES2-DsRed-Express分别与pCx26-EGFP或pCx26-235deIC-EGFP以1:1的比例用脂质体法转染HEK293细胞,转染48 h后在激光共聚焦显微镜下观察结果,计算同时表达红色和绿色的细胞阳性率,卡方检验比较两组阳性率的差异.结果 pCx30-IRES2-DsRed-Express与pCx26-EGFP共同转染HEK293细胞后,同时出现红色和绿色荧光的细胞占全部转染阳性细胞的27.32%(91/333).pCx30-IRES2-DsRed-Express与pCx26-c235 deIC-EGFP共同转染HEK293细胞后,同时表达红色与绿色信号的细胞占全部阳性细胞的2.1 9%(4/183),明显低于两种野生型质粒共同转染的阳性率,经卡方检验两者差异具有显著性意义(χ2=52.89,P<0.01).结论 Cx26发生C.235 deIC突变后,丧失了与野生型Cx30形成异型性缝隙连接gap junctions,GJs)的能力,使异型性GJs的总数显著下降,导致耳蜗失去了重要的细胞间联系通道,推测可能与部分c.235 deIC杂合子耳聋的发生有关.

关键词：缝隙连接蛋白26、突变、GJB6基因、杂合子、耳聋

分类号：R764.5(耳鼻咽喉科学)

资助基金：全军十一五项目归国人员课题06H048;国家自然科学基金面上项目青年基金30700936

在线出版日期：2010-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：13-17